牛磺胆酸钠的制备工艺研究

 牛磺胆酸钠的制备工艺研究

       牛磺胆酸钠(TCANa)广泛存在于牛、羊、蛇等脊椎动物的胆汁中，它也是蛇胆的主要胆汁酸。

TCANa是胆酸(CA)的羧基与牛磺酸的氨基以酰胺键相联而成的一种结合型胆汁酸。据文献报道,新鲜的蛇胆汁中几乎不含游离胆汁酸，但市售的商品蛇胆，由于贮存方法不当，普遍含有一定量的游离胆汁酸。由于肝胆疾病也可引起TCANa分解为游离型的胆酸钠(CANa)，它们均具有一定的镇咳、祛痰、平喘、抗炎、抑菌等作用,以往报道的胆汁酸药效作用，多数都是以游离型的CA为研究对象,而TCANa由于亲水性强。不易从胆汁中分离提取，故限制了其药理作用的研究。为此,我们用化学合成的方法制备了TCANa,对其结构进行了表征，并与CANa进行了药效学对比研究。

一、　材料与方法

试剂及药品：胆酸(北京生化制药三厂,批号:980716)、可待因注射剂(15 mg/mL，沈阳制药厂，批号:990512)、氨茶碱注射剂(100 mg/mL，石家庄第二制药厂，批号:990825)、乙酰胆碱均为市售;磷酸可待因由华中科技大学同济医学院法医系提；对照品牛磺胆酸钠购自美国Sigma公司；无水乙醇、甲醇、乙酸乙酯、石油醚(30~60℃)、亚硝酸钠、碳酸氢钠为分析纯;牛磺酸、发烟硫酸、氢氧化钠、水合肼、盐酸、硅胶G、氨水为化学纯。

　仪器：红外光谱仪用美国NICOLET 170SX FT-IR光谱仪，,KBr压片，核磁共振仪为AC-300P型。TMS为内标，CD3OD为溶剂；熔点用毛细管法测定，温度未校正。二道生理记录仪为LMS-2A型(成都仪器厂)，拉力换能器为YL-I型(北京医学仪器厂出品)，分光光度计为751G型(上海分析仪器厂)。

二、　牛磺胆酸钠的合成

胆酸乙酯(ethyl cholate,EC)的合成，将20 mLw(SO3)=20%~30%的无色发烟硫酸加入预冷到0℃的500 mL无水乙醇中。搅拌反应混合物,在2 h内缓慢加入50·0 g CA直至完全溶解。放入5℃冰箱静置过夜,然后，将混合物冷至0℃，在搅拌下。按比例缓慢加入2000 mLc(NaOH)=0·5 mol/L的冰冷水溶液。每加完一部分,要等到结晶后，再加另一部分,以避免结成大块。在搅拌下加入100 mL乙酸乙酯，然后放入冰箱静置12 h，,将产物抽滤,用冷水洗涤，用CaCl2作干燥剂在真空干燥器中抽真空至完全干燥，溶解于400mL沸腾的乙酸乙酯。将足量的石油醚加入热溶液中使最终体积为2000 mL。室温静置36 h后，将产物过滤,洗涤(用相同的溶剂),在空气中干燥。得43.0~46.0 g EC，收率为82%~90%，熔点162~163℃。