试用HPLC法测定蛇胆中牛磺胆酸钠的含量
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试用HPLC法测定蛇胆中牛磺胆酸钠的含量
蛇胆为传统中药,性凉,味苦微甘,无毒。功能主治为祛风、清热、化痰、明目,蛇胆中牛磺胆酸钠的含量因蛇的品种不同、季节不同而异,以致引起制剂中牛磺胆酸钠含量的波动。为了保证蛇胆投料的准确性和制剂质量,对蛇胆中牛磺胆酸钠含量进行测定。据文献报道:对含有蛇胆的中成药,目前通过测定胆酸或牛磺胆酸钠含量以控制其质量,有薄层扫描方法、比色法;对蛇胆的测定也是采用比色法。本文建立了HpL(:法测定蛇胆中牛磺胆酸钠含量。此方法简单快速、结果准确可靠。
仪器与试药
岛津SPD一roAuv一vis检测器,岛津LC一10AT液相色谱仪;牛磺胆酸钠(由SI〔;MA公司提供)供含量测定用,蛇胆(从不同蛇场购得),甲醇为色谱纯,其余试剂为分析纯。
方法与结果
对照品溶液的制备精密称取在150℃干燥至恒重的牛磺胆酸钠对照品约20mg,置25而量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。
样品溶液的制备取胆汁约19,精密称定,于水浴上蒸干,加水10耐溶解,用水饱和的正丁醇提取三次,每次10时,合并正丁醇液,用水洗两次,每次5而,弃去水液,正丁醇液置水浴上蒸干,用甲醇定容至snil。
色谱条件天津SuntekKr0IllasilC,8柱(lsoxs.0~5妇;甲醇一磷酸盐缓冲液(KHZR)42.049+姚O~500血)(75:25)为流动.550.相,流速1耐/min;柱温35℃,检测波长210nm,理论板数按牛磺胆酸钠峰计算应不低于1000。
标准曲线的制备精密称取牛磺胆酸钠对照品适量,用甲醇制成1耐含smg的对照品溶液。精密吸取对照品溶液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0耐分别置于ronil量瓶中,用甲醇稀释至刻度,混匀。取10μl进样,按色谱条件测定。以浓度为横坐标,积分值为纵坐标作图,得一直线,回归方程为:Y二209.5+1527.巧X,r二0.9998。牛磺胆酸钠在5一25雌之间成线性关系。2.5加样回收试验精密量取已知含量的蛇胆汁样品(5.4m群g)0.59五份,分别加人已配制好的对照品溶液(1.(241119/ml)Zd,按上述方法测定计算,平均回收率97.68%,RSD1.96%。
样品含量测定分别精密称取不同蛇场的蛇胆汁,依上述方法测定含量。含量测定结果(n二3)样品平均含量(m岁g)RSD(%)浙江蛇胆5.400.98佛山野生蛇胆6.673.37市场收购蛇胆8.143.87。

