酸性溶剂系统和硷性溶剂系统
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酸性溶剂系统和硷性溶剂系统
酸性溶剂系统在这类溶剂系统中,大多数均以70%醋酸作为规定的固定相,层析滤纸用上述溶剂洗涤,100℃干燥,在糟中平衡,这样的处理方法在实验中对于所有的溶剂系统,都能给出良好的效果。
Sjovall氏对于各种结合胆汁酸和游离胆汁酸进行了系统的纸上层析实验,他的方法是以Whatman.3mm为层析滤纸,层析滤纸浸渍在70%醋酸中,很快在1000C烘箱中干燥,然后立即点样到纸上。在应用异丙醚:庚烷溶剂系统时,色层缸必须以两相的溶剂饱和,当点样后层析前,滤纸至少应在缸中平衡8小时。
应用异丙醚~庚烷(60:40)为溶剂系统,对于游离胆汁酸和甘氨酸结合物的分离给出很好的效果。用不同比例的异丙醚~庚烷混合物(从85:15到10:90)来分离游离酸或甘氨酸的结合物,显示了一个很好的解析光.学异构的能力,当在移动相中增加庚烷的比例时,胆汁酸的Rf值下降。
通常应用上行法,对于未知胆汁酸的混合物是一个很好的初步分析法。为了增大分离因素,下行法通常是被采用。例如应用异丙醚一庚烷(50:50)下行色层,时间为15小时,能够分离二个经基同分异构的甘氨酸结合物,有去氧胆酸、鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸和猪去氧胆酸的结合物。
这个方法也适用于分离游离的三个取代基的胆烷酸,如胆酸、3a,1Za一二经基一7一酮基胆烧酸和3a,7日,12a一三经基胆烷酸。当应用异丙醚~庚烷(20:80)下行色层,时间为18小时,可分离游离的二个经基的同分异构体,有去氧胆酸、鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸和猪去氧胆酸。在异丙醚一庚烷溶剂系统中,不同取代基的胆汁酸大致显示如下的一些规律:酮基胆汁酸的R:值较相应的经基酸为低,甲醋的R;值大大地超过游离胆汁酸,大约相当于从母体酸中失去一个经基的Rf值;甘氨酸结合物下降的R:值,有时候超过一个轻基到母体酸中的R,值。
Sjovall氏还报道了在氯乙烯~庚烷溶剂系统及醋酸异戊醋一庚烷溶剂系统中,结合的或游禽的胆汁酸的色层分离情况。

