结合胆汁酸和游离胆汁酸的薄层分离法
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结合胆汁酸和游离胆汁酸的薄层分离法
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应用硅胶薄层层析在分离动物胆汁中的胆汁酸,应用广泛,效果很好,却具有一定的实用价值,下面再重点地介绍几种有效的分离方法。
结合胆汁酸和游离胆汁酸的薄层分离法, 日人宇治昭氏,应用甲苯:乙醇:水(10:10:1)为展开剂,30%H2SO4为检出液,2100C烘数分钟,应用硅胶(WakogelB-5)进行薄层层析,能较好地分离熊、牛、猪及野猪胆汁中的牛磺胆酸、牛磺去氧胆酸、甘氨胆酸、甘氨去氧胆酸、胆酸及去氧胆酸,但是对于二个径基的同分异构体的结合酸分离效果不好。
几种游离胆汁酸的薄层图谱据泰州生化药厂报道:应用硅胶铺板,苯:冰醋酸(80:20)为展开荆,茵香醛试剂显色,满意地分离了胆酸、去氧胆酸(或鹅去氧胆酸)、石胆酸,但是对于二个经基的同分异构游离酸效果仍不够理想。
胆汁与牛羊胆汁的鉴别,笔者应用异辛烷:乙酸乙醋:醋酸(10:10:2)作溶剂系统,进行硅胶板的薄层层析,并喷以菌香醛一浓H2SO4显色,可以满意地分离胆酸、去氧胆酸及a一猪去氧胆酸,井成功地应用于猪胆汁与牛羊胆汁掺混的鉴别。
胆汁样品的制备方法是:1毫升胆汁加4毫升乙醇沉淀杂质,过滤,滤液水浴蒸干,加0.5毫升乙醇溶解残渣备用。每次以毛细管点样一到二次即可。显色后,游离或结合的胆酸呈紫色,去氧胆酸呈红色~红棕色,a一猪去氧胆酸显蓝色。


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