猪胆汁中胆酸皂化工艺研究
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猪胆汁中胆酸皂化工艺研究
猪胆汁为猪科动物猪的胆汁,是一种历史悠久的传统中药,其性味苦寒、无毒、具有清热解毒、止咳、平喘、利胆明目等功效,其药用价值早在《本草纲目》、《中国大药典》等中草药经典文献中都有记载。胆酸是猪胆汁经皂化分离捉取的一种生化物质,化学名称是3a,7a -二羟基- 5[3一胆烷酸,分子式为C24H40O5,相对分子质量是408.6,是一种白色片状结晶,属酸性化合物。目前对于猪胆汁的加工利用主要是胆红素和去氧胆酸的提取和纯化,本研究采用胆红素和胆酸联产工艺方案,以胆汁提取胆红素生产过程中的滤去
胆钙盐的母液为原料,进行皂化工艺研究。
方法
总胆汁酸的制备收集胆红素的母液,用盐酸调pH值到3.5,静置12 h,收集绿色黏状物,用蒸馏水洗涤沉淀,得到总胆汁酸。
胆酸标准曲线绘制精密量取胆酸标准品12.5 mg,置于25 mL容量瓶中,加入60%醋酸溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL分别置带塞试管中,用60%醋酸溶液稀释1.0 mL,加1%糠醛溶液1 mL,在冰浴中放置5 min,加硫酸溶液13 mL混匀,在70℃水浴中加热10 min,迅速移至冰浴中放置2min取出,以相应试剂为空白,使用岛津UV- 260紫外分光光度计在605 nm波长处测定吸光度,根据测定值绘出标准曲线图。
结果与分析
盐酸浓度对总胆酸提取率的影响
收集提取胆红素的母液100 mL,蒸出多余的二氯甲烷后,用1:1、1:2、1:3、1:4、1:5的盐酸调pH值至3.5,静置12 h,收集绿色黏状物,用蒸馏水洗涤沉淀,然后加入10 9的NaOH,100℃下皂化12 h,最后测定总胆酸的提取率,选取最佳的盐酸浓度。采用SAS 8.2统计软件对实验结果进行统计分析。
可以看出,在研究盐酸浓度的五点3次重复的因素分析中,F值为2157,p <0.0001,说明不同盐酸浓度对总胆酸提取率有极显著的影响。盐酸浓度在1:1-1:2时总胆酸提取率不断上升,盐酸浓度为1:2时提取率达到最大值,且差异显著①<0.05),随着盐酸浓度的降低提取率有所下降。由相关系数为0.3765可知盐酸浓度对总胆酸提取率的相关性较小,因此本实验不对盐酸浓度进行优化,通过单因素实验确定最佳盐酸浓度为1:2。
pH值对总胆酸提取率的影响
收集提取胆红索的母液100 mL,蒸出多余的二氯甲烷后,用1:2的盐酸调pH值至1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5六个水平,静置12 h,收集绿色黏状物。用蒸馏水洗涤沉淀,然后加入10 9的NaOH,100℃下皂化12 h,最后测定总胆酸的提取率,对实验结果进行统计分析。
可以看出,在研究pH值的五点3次重复的因素分析中,F值10.56,p<0.05,说明不同盐酸浓度对总胆酸提取率有显著的影响。pH值在1.5-3.0时总胆酸提取率不断上升,pH值为3.0时总胆酸提取率达到最大值,且差异显著①<0.05),随着pH值身高提取率有所下降。由相关系数为0.2969可知盐酸浓度对总胆酸提取率的相关性较小,因此本实验不对pH值进行优化,通过单因素实验确定最佳pH值为3.0。

