杭州宝积为您介绍熊去氧胆酸的测定方法
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熊去氧胆酸在熊胆粉中,UDCA主要以与牛磺酸结合的形式存在,即牛磺熊去氧胆酸,对结合型的TUDCA的含量,一般采用高效液相色谱法。目前普遍采用高效液相色谱法测定结合型TUDCA的含量,代替UDCA的含量测定,作为熊胆粉质量的定量标准。HPLC法对于UDCA的测定,利用离子抑制作用,在pH2~3的强酸性条件下,200nm附近可以检测;由于胆酸的最大响应波长在200nm的低波长区域,仪器噪音水平高,灵敏度较低。选择合适的衍生化试剂如苯胺、苯肼等,柱前衍生化反应,接上紫外吸收基团,测定波长在230nm以上,从而避免了噪音干扰。
对UDCA含量的测定,药典2000年版中以酸碱滴定法为定量方法,该法对于低浓度的无法测定,对于多组分的酸性胆汁酸无法定量。药典2005年版中薄层法作为定量方法,TLC和HPTLC分析胆汁酸广泛应用。 胆酸的GC分析,主要方法是先将样品水解,再进行衍生化,复杂费时;但Keller等人利用GC-MS-SIM对胆固醇和胆酸进行了非衍生分析, 测定了粪便中的7种胆酸。HPLC/MS质谱法也获得了较好的分离效果。
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