研究牛磺胆酸抗炎作用及其机理的试验
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研究牛磺胆酸抗炎作用及其机理的试验
一、材料
1·1 动物
清洁级、纯昆明种小白鼠,体重18±2g;清洁级W istar大白鼠,体重200±20ɡ,均由内蒙古大学实验动物研究中心提供。
1.2 药品与试剂
牛磺胆酸,由本实验室从牛胆汁中分离提取,纯度为98%;牛磺胆酸标准品,由Sigma公司提供;地塞米松磷酸钠注射液,河南开封前锋制药厂,批号:0304292;伊文氏蓝(EvansBlue),上海化学试剂采购供应站经销,批号: 82-1102;二甲苯,分析纯,天津化学试剂有限公司,批号: 20010812;甲醛,分析纯,呼和浩特市化学试剂厂,批号: 20000611;盐酸,优级纯,天津化学试剂三厂,批号: 20030728;正庚烷,分析纯,天津市化学试剂三厂;N-乙酰半胱氨酸,批号: 021027,购自Sigma公司;硫酸奎宁,批号:840313,上海试剂二厂生产。
1.3 主要仪器
TU-1901双光束紫外可见分光光度计,北京普析通用仪器有限责任公司; 721分光光度计,上海第三分析仪器厂;台式离心机,TDL-5-A,上海科学仪器公司;日立850型荧光分光光度计,日本日立公司生产。
二、方法与结果
2·1 牛磺胆酸对二甲苯所致小白鼠耳壳炎症的影响
采用小鼠二甲苯致炎法。取小白鼠48只,随机分成4组,每组12只。第1组为阴性对照组,按10ml/kg蒸馏水灌胃。第2组为TCA低剂量组,按0. 125g/kg灌胃给药。第3组为TCA高剂量组,按0. 25g/kg灌胃给药。第4组为阳性对照组,按0. 005g/kg皮下注射地塞米松磷酸钠。各组每天给药1次,于第4d给药1h后,左耳壳前后两面涂布二甲苯0. 02ml/只。致炎后30min,脱臼处死小白鼠。用直径0. 6cm的穿孔器将两耳壳穿孔取下,分别称重,求出两耳重量差。以两耳重量差作为炎症肿胀程度的指标进行t检验。
结果表明,高、低剂量的TCA对二甲苯所致小鼠耳壳肿胀均有极显著的抑制作用。
2·2 牛磺胆酸对小白鼠皮肤毛细血管通透性的影响
采用皮内染料渗出法。分组与给药方法同2. 1。于第4d给药1h后,尾静脉注射0. 5%伊文斯蓝生理盐水溶液,随即于每只小白鼠背部皮内注入二甲苯致炎,然后脱臼处死小白鼠,切开背部皮肤,将蓝染的皮肤剪下并切碎,放入6ml丙酮生理盐水(7: 3)混合液中浸泡24h,离心后,取上清液,用721分光光度计(λ=610nm)测定光密度(OD)值,以光密度值表示色素滤出量,并进行检验。

