应用薄层扫描法对复方熊胆水进行含量测定
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应用薄层扫描法对复方熊胆水进行含量测定
仪器、药品和试剂薄层扫描仪,微量注射器,硅胶G预制薄层板。熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸标准品均由中国药品生物制品检定所提供。其他试剂为分析纯。复方熊胆水自制,主要由黄柏、侧柏叶、白芷、熊胆等8味药组成。
方法与结果
标准液的制备精称UDCA和(CDCA)适量混合,用无水乙醇溶解定容为2ml。
薄层层析条件硅胶G预制板,甲醇立式展开,取出晾干后,于lo5C活化o.sh,置干燥器内保存备用。展开剂异辛烷一异丙醚一冰醋酸一正丁醇一水(10,5,5,3:1),卧式展开2h,显色剂30%(V/V)硫酸乙醇溶液喷板,105一11oC烘15min。
扫描条UDCA和CDCA均于375nm有最大吸收,在700nm吸收最小。故选择375nm
为样品测定波长,7O0nm为参比波长,采用反射法锯齿扫描。
扫描重现性和方法精密度考察取经展开显色后的薄层板重复扫描6次,6次扫描斑点面积积分值经统计分析,结果表明(CDCA)的RSD为0.2%,UDCA的RSD为0.98%。取薄层板6块,点相同量的样品,经展开显色后,分别进行扫描测定,UDCA的RSD为2.9%;(CDCA)的RSD为2.6。
线性关系考察分别吸取标准液l,2,3,4,5川点于同一薄层板上,展开,显色,扫描。以点样量印g)对色谱峰面积进行回归。
中药复方制剂中组分较多,引起TLC斑点拖尾,不圆整,以致分不开,本研究采用直接提取法、反提法、酸化法、酸化反提法和明胶沉淀法进行前处理,力图去除一定量的杂质,使含量测定不受其干扰。实验结果,明胶沉淀法和酸化反提法去除杂质效果较好,但前者对UDCA和(CDCA)的提取回收率较低,故本文选择酸化反提法


宝积生物•胆汁酸专家 0571-88604801